En contraste con la PCR, en la que la reacción se lleva a cabo con una serie de ciclos de temperatura alternos, la amplificación isotérmica se lleva a cabo a temperatura constante y no requiere un termociclador. En lugar de desnaturalizar el ADN mediante el uso de altas temperaturas, la amplificación isotérmica aprovecha las ADN polimerasas que tienen altas capacidades de desplazamiento de cadena, por ejemplo, las polimerasas Bst o Phi29. Estas enzimas tienen la capacidad de "descomprimir" el ADN a medida que sintetizan hebras complementarias, eliminando la necesidad de usar termocicladores, ya que la reacción se lleva a cabo a una temperatura. Los métodos isotérmicos que utilizan ADN polimerasas de desplazamiento de cadena incluyen la amplificación por desplazamiento múltiple, la amplificación del genoma completo y la amplificación isotérmica mediada por bucle o LAMP.

El producto de multiplicación se puede detectar mediante fotometría, midiendo la turbidez causada por el precipitado de pirofosfato de magnesio en solución como subproducto de la amplificación, mediante cambio de color usando tintes intercalantes o en un gel de agarosa.

Para la detección isotérmica, PCR Biosystems presenta la gama IsoFast™ con la polimerasa IsoFast™ Bst que permite una amplificación rápida y sensible de los objetivos de ADN y ARN a una temperatura constante de alrededor de 65 °C. Esta polimerasa está disponible en formatos flexibles con y sin tinte fluorescente y como mezcla 2x.

  • Actividad polimerasa 5′-3′ sin actividad exonucleasa 5′-3′
  • Actividad de desplazamiento de cadena
  • Opera en un amplio rango de temperatura, con un óptimo de 65ºC
  • Proporciona una amplificación rápida y constante en una amplia gama de plantillas.
  • Avanzado sistema de tampón en 2 partes para mayores rendimientos en condiciones difíciles.
  • Protocolo de 30 minutos
  • Formatos flexibles con y sin tinte fluorescente y en mezcla 2x
  • Enzima sin glicerol

Para una amplificación isotérmica rápida y sensible de los objetivos de ARN en un solo paso se puede usar el kit IsoFast™ Bst 1-Step Mix.

  • Validado para la detección cualitativa del ácido nucleico del SARS-CoV-2
  • Incluye la polimerasa IsoFast™ Bst de desplazamiento de hebra en un formato de mezcla 2x
  • Incluye MMLV RTase Go modificado altamente activo.
  • La reacción se realiza a 65 °C.
  • Proporciona una amplificación rápida y constante en una amplia gama de muestras.
  • Incluye un sistema de tampón avanzado para un mayor rendimiento en condiciones difíciles
  • Se suministra con un tinte fluorescente para detección en tiempo real.
  • Protocolo de 30 minutos